COVID-19 vakcináció
Mikor mit mérünk, hogyan értékeljünk.
QuaqliCont szerepe az egységes értékelésben.
Ujhelyi Eszter GM Labor Budapest
COVID-19 vakcináció
A SARS-2 vagy COVID-19 vírus felépítése, és sejtekbe való bejutása hasonló a HIV vírussal történő fertőződésre. A vírus RNS a vírus közepén helyezkedik el, ezt veszi körbe a Nucleocapsid fehérje. A vírus külső burkát képező lipid menránba további 3 fehérje ágyazódik be. Ezek az Envelope fehérje, a Membrán fehérje, és a Spike fehérje. A fertőződés szempontjából a Spike fehérjének van szerepe, ugyanis ez a fehérje kötődik a megfertőzendő sejt ACE2 (angiotensin-converting enzyme 2 ) receptorához. Azonban ahhoz, hogy a vírus be tudjon jutni az ACE2 receptorral rendelkező sejtbe szükség van egy u.n TMPRSS (transmembrane protease serine 2) coreceptorra is. Csak az a sejt tud megfertőzödni, amelyik felszínen mindkét receptor megtalálható.
A COVID fertőzés után meghatározott sorrendben jelennek meg a diagnosztika számára mérhető vírus partikulumok, ( RNS, illetve antigén) illetve ellenanyagok.
A vírus RNS a fertőződés után 4-5 nappal már PCR technikával mérhető, és egyedi eltéréstől függően 10-12 napig pozitív marad. A gyorstesztekkel kimutatható antigén szinte egyszerre mutatható ki a vírus RNS-sel, de csak 4-5 napig marad pozitív. Irodalmi adatok szerint ha már vírus antigén nem mutatható ki, akkor a vizsgált személy nem fertőz. Ezért fogadják el sok helyen a PCR vizsgálatok helyett a gyorsteszttel végzett antigén vizsgálatokat. A vírus ellen termelődött ellenanyagok a fertőzés után meghatározott sorrendben jelennek meg. A járvány elején a COVID-19 IgA és IgM
ellenanyagok egyértelműen korai fertőzésre utaltak, ilyen esetben javasolt, indokolt volt a PCR vizsgálat elvégzése.
A járvány szempontjából fontos volt a szennyvíz COVID-19 RNS vizsgálata, hiszen a vírus ürítés a széklettel hamarabb történik, mint ahogyan ezt az orr illetve garat mintákból ki lehet mutatni. Ezzel előre lehetett jelezni, hol várhatóak nagy számban az újabb fertőzések.
Miért volt fontos a járvány kezdeti szakaszában a COVID 19 IgA, illetve az IgM kimutatása?
Eddigi ismereteink szerint az N-IgM jelenik meg leghamarabb, a tünetek megjelenése után 2-3 nappal. Az S-IgM ezt követően, kb az 5. nap körül jelenik meg, párhuzamosan az IgA ellenanyaggal. Ebben a periódusban már mérni lehet a totál IgM-t és IgG-t is.
Az N-IgM és N-IgA megjelenésekor aktív a vírusszaporodás, azaz PCR pozitivitás van. Tehát olyan teszttel végzett IgM és IgA pozitivitás, mely az N-ellenanyagokat ki tudja mutatni, jelezheti a korai fertőzést, ebben az esetben javasolt a PCR vizsgálat. PCR pozitivitás esetén pedig el kezdeni a kontaktuskutatást. Az N-IgM a fertőzés után kb. 3 hónappal éltűnk.
Megfelelő teszttel végzett szerológiai szűrővizsgálatok alkalmasak lehetnek a korai fertőzések kimutatására.
Azok a tesztek, melyek csak IgG-t tudnak kimutatni, a korai fertőzést nem jelzik, csak a korábban lezajlott, már PCR negatív fertőzést tudják azonosítani.
A vakcinák megjelenése után egyre fontosabbá vált, hogy meg lehessen különböztetni azokat az ellenanyagokat, melyek a vakcina eredményességét, illetve azokat az ellenanyagokat, melyek a lezajlott COVID fertőzést igazolják.
Akut fertőzés: |
Nucleocapsid N-IgM+, IgA+, Spike S-IgM + IgG még nem mutatható ki, PCR vizsgálat javasolt |
Lezajlott fertőzés: |
Nucleocapsid és Spike IgM + Nucleocapsid és Spike IgG + |
Vakcináció: |
Spike- RBD (receptor bound protein) S-IgG + Nucleocapsid N-IgG nem mutatható ki ( kivéve az inaktivált, teljes vírust tartalmazó Sinopharm vakcinát) |
Fertőzésen átesett + vakcinált |
Spike –RBD (receptor bound protein) S-IgG+ Nucleocapsid N-IgG kimutatható+ |
Sokszor felmerül a kérdés, hogy az első vakcina beadása után hány emlékeztető oltásra van szükség, hogyan mérhető a vakcina eredményessége, mennyire tartós a vakcina következtében kialakult ellenanyag szint, van-e valamilyen káros következménye a többször ismételt vakcinációnak.
Egyre több cikk foglalkozik azzal, hogy nem elegendő a humorális immunválaszt nézni, hanem a celluláris immunválasznak, elsősorban a memória T sejteknek fontos serepe van a fertőzés elleni védekezésben. Sok személy még 3 eredményes vakcináció után sem kerülte el a fertőzést, annak ellenére, hogy magas Spike IgG ellenanyag títerrel rendelkezett. Az újabb COVID fertőzés a már korábban lezajlott fertőzés sem tudja kivédeni, sokan estek át második, esetleg harmadik fertőzésen. A vakcináció mai tudásunk szerint ugyan nem akadályozza meg a fertőzést, de mindenképpen szerepet játszik a betegség enyhébb lefolyásában.
A celluláris immunitás (memoria T sejtek) mérésére ma már vannak elérhető laboratóriumi módszerek.
A Magyarországon használt vakcinák
- m-RNS vakcina (Pfizer, Moderna)
A vakcináció során m-RNS-t juttatnak a szervezetbe. Az mRNS a COVID Spike fehérjék sejtfelszinen történő megjelenését indítja be, ami ellen megindul a specifikus IgG ellenanyag termelés.
Az m-RNS vakcinák után a Spike (RBD azaz Receptor Bound Doman) IgG fehérje 2 héttel már mérhető.
- Vektor alapú vakcinák (Astra Zeneca, Sputnik-V)
Elölt adenovírusba csomagolt Spike fehérjét kódoló gént tartalmaz. Az Astra Zeneca esetében min a két oltásnál azonos adenovírust, míg a Sputik-V esetében eltérő adenovírus használnak.
- Elölt teljes vírus használó vakcina (Sinopharm)
Teljes, elölt, inaktivált vírus, nem fertőzőképes.
Gyártás során fel kell szaporítani a vírust, majd kémiai módszerrel inaktiválni.
A vírus hatékonyságát növeli az adjuváns, azaz vivőanyag
( Ilyen technológiával készül a influenza vírus elleni, illetve a gyermekbénulás elleni oltóanyag)
Kérdés, hogy az oltás hatására a Spike ellenanyagon kívül még milyen ellenanyag termelődik.
Mérhető ellenanyag a 2. oltás után jelentkezik.
Annak érdekében, hogy a Pfizer vakcináció után hogyan indul be a Spike ellenanyag képzés, saját korábban fertőzésen át nem esett dolgozóinknál Spike ellenanyag vizsgálatát végeztük el. (Elecsys 411) az eredményt U/ml-ben kaptuk.
100%-nak tekintettük a títert 10 nappal a másik oltás után. Az egyedi eltérés igen magas volt.
Spike (RBD titer) U/ml 1-ső oltás után 15 nappal |
0,11-3,68 % |
0,47-55,3 U/ml |
Spike (RBD titer) U/ml 1-ső oltás után 21 nappal |
0,35-5,66 % |
187,4-8.200 U/ml |
Spike (RBD titer) U/ml 2. oltás oltás után 10nappal |
100 % |
250-8.200 U/ml |
Spike (RBD titer) U/ml 2. oltásoltás után 1 hónappal |
30-50% |
|
Ellenanyag szint mérése
A vakcináció bevezetése után rendkívül fontossá vált, hogy lehessen mérni az oltás hatására kialakult ellenanyag szintet. Sokan a kapott eredmények alapján döntöttek az újabb oltások felvételéről.
A laboratóriumok nagyon hamar ráálltak a nagy vizsgálati számra alkalmas automaták beszerzésére, illetve a COVID ellenanyag vizsgálatára, akár hagyományos ELISA módszerrel, akár kémiai automatával vágezve.
E miatt vált egyre fontosabbá, hogy a QualiCont bevezesse a körvizsgálatokat a PCR vizsgálatokra, a szerológiai vizsgálatokra, és a POCT vizsgálatokra is.
A szerológia vizsgálatoknál a leggyakrabban használt készülékek Roche Elecsys, Siemens, Beckmann, Abbott, DiaSorin.
A készülékek egy része egybe méri a Nucleocapsid és Spike ellenanyagokat, így nem tud különbséget tenni a lezajlott, illetve a vakcináció hatására kialakult ellenanyagok között. Van olyan készülék, amely egymástól függetlenül, kétféle teszttel nézi a Nucleocapsid, illetve Spike IgG ellenanyagokat, így el tudja különíteni, hogy az illető korábban átesett-e a COVID fertőzésen.
A különböző automatáknak eltérő cut off számítása, van ahol az eredmény már 1 U/ml vagy AU/mlben pozitív, van olyan készülék, ahol ez a határérték 10, van ahol 30. E miatt az alacsony títerű mintákat egyes laborok pozitívnak, mások negatívnak értékeltek.
Ez elsősorba a Sinopharm vakcinák esetében okozott problémát, (a Sinopharm vakcinák esetébensokkal alacsonyabb az ellenanyag títer mint a többi vakcinánál) mert sok esetben negatív eredményt adtak ki, annak ellenére hogy valamilyen szintű ellenanyag termelés megtörtént.
A QualiContnak igen fontos a szerepe,
1./ A védettségi igazolvány kiállításához igazolni kellett a korábban lezajlott fertőzést
2./ A vakcináció eredményességét jelenleg csak a Spike-IgG quantitatív mérésével lehet ellenőrizni
3./ A vizsgálatok száma rohamosan emelkedett, ezért egységes szempontok szerint kell a vizsgálatokat végezni és az eredményeket interpretálni.
Fontos, hogy a laboratóriumok olyan rendszereket használjanak, melyek képesek a lezajlott fertőzést az eredményes vakcinációtól elkülöníteni.
A vakcináció eredményes bizonyításához be kell tartani a „ türelmi időt” azaz meg kell várni, hogy az immunrendszer ellenanyagot tud termelni.
A különböző vakcinák hatására igen eltérő ellenanyag válaszokat kaptunk, több mint 2.000 vizsgálat alapján, 6 hónappal a második vakcináció után. A Spike ellenanyag títer U/ml egységben van megadva.
Az 5 féle vakcina eredményasségét az alábbi ábrák mutatják, életkor függvényében, az eredmények a Spike IgG U/ml -ben vannak megadva.
Annak nyomon követesé, hogy a korábban fertőzésen át nem esett fiatal felnőttekben a vakcináció után hogyan emelkedik, illetve csökken a Spike ellenanyag szint, egy 41 éves nő, illetve egy 43 áves férfi eredményeit mutatjuk.
41 éves nő |
S IgG U/ml |
N IgG score |
Oltás
|
|
2021.02.03 |
42,38 |
1. Pfizer 2021.01.13. |
||
2021.02.10 |
2573 |
2. Pfizer 2021.02.03. |
||
2021.03.05 |
1301 |
|
||
2021.04.09 |
528 |
|||
2021.04.29 |
1211 |
|||
2021.04.30 |
614 |
|||
2021.06.15 |
578,3 |
|||
2021.11.03 |
220 |
|||
2022.02.15 |
7458 |
3. Pfizer 2022.01.20. |
||
2022.06.01 |
819,5 |
|
|
43 éves férfi |
S IgG U/ml |
N IgG score |
Oltás
|
|
2021.02.05 |
46,81 |
1. Pfizer 2021.01.15. |
||
2021.02.12 |
1859 |
2. Pfizer 2021.02.05. |
||
2021.03.10 |
1197,5 |
|
||
2021.04.09 |
982 |
|||
2021.06.15 |
1224 |
|||
2021.08.31 |
1071 |
|||
2021.12.16 |
119 |
3. Pfizer 2021.12.17. |
||
2022.01.24 |
39440 |
|
||
2022.06.01 |
6031 |
PCR POZ 2022.07.21. |
||
2022.09.02 |
9806 |
1,22 |
|
Irodalom
COVID-19: angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expression and tissue susceptibility to SARS-CoV-2 infection Stephany Beyerstedt 1 , Expedito Barbosa Casaro 1 , Érika Bevilaqua Rangel 2 3 Eur J Clin Microbiol Infect Dis . 2021 May;40(5):905-919.
Elecsys® Anti-SARS-CoV-2 S Immunoassay for the quantitative determination of antibodies to the SARS-CoV-2 spike protein (Roche)
Covid-19 antibody testing: what you need to know 5 March 2021info@harrowhealthcare.co.uk
The WHO International Standard for COVID-19 serological tests: towards harmonization of anti-spike assays Maria Infantino,a,⁎ Massimo Pieri,b,c,d Marzia Nuccetelli,c Valentina Grossi,a Barbara Lari,a Flaminia Tomassetti,d Graziella Calugi,d Silvia Pancani,a Maurizio Benucci,e Patrizia Casprini,f Mariangela Manfredi,a and Sergio Bernardinib,c,g Int Immunopharmacol. 2021 Nov; 100: 108095.
A comparison of SARS-CoV-2 nucleocapsid and spike antibody detection using three commercially available automated immunoassays Brad Poore,a,b,⁎ Robert D. Nerenz,a,b Dina Brodis,c Charles I. Brown,a,b,c Mark A. Cervinski,a,b and Jacqueline A. Hubbarda,b Clin Biochem. 2021 Sep; 95: 77–80.
SARS-CoV-2 elleni védőoltások eredményességének összehasonlító elemzése. ELTE-BTDK 2021 Máté Richard
A minőségellenőrzés szerepe a megfelelő ellenanyag kimutatására alkalmas teszt kiválasztásában az akut, valamint a lezajlott COVID fertőzés esetén és az eredményes vakcináció kimutatásábanDr Ujhelyi Eszter MikroMikoMed kft XI.Országos Infekciókontroll és Betegbiztonság Konferencia Budapest 2022 október 26-27
Az első magyar SARS-CoV-2 körvizsgálatokkal szerzett tapasztalatok Ujhelyi Eszter, Sárkány Erika, Danszky Dániel, QualiCont Kft Szeged. A SARS-CoV-2 vírusfertőzés laboratóriumi vizsgálata MLDT online szakmai rendezvény. 2020. október 15.
Nézzék meg a leggyakrabban végzett laborvizsgálat területeink bemutatását:
- Allergia, ételallergia vizsgálat
- STD szűrés
- Pajzsmirigy labor
- Tumormarker vizsgálat
- Hormonvizsgálat
- COVID szűrés
Vissza a GM Labor COVID-19 vakcináció blog oldalról a GM Labor főoldalra >
GM Labor Budapest, Veszprém
Megújult a GM Labor
A GM Labor (gmlabor.hu) a MikroMikoMed Kft. és a G1 Labordiagnosztikai Kft. az online csatornákon és a közösségi médiában való megjelenítésének együttes megnevezése. Elérhetőségeink, csapatunk, mottónk a régi! Várjuk szerettetel a megújult felületeinken, és személyesen a megszokott helyen, Budapest 3. kerület, Lajos utca 74-76. I. emeleten és Veszprémben az Arany János utca 16. alatt.
Dr. Széll András
Rendelési idő
Minden munkanap 8:00 - 10:00 óra között, időpontfoglalás nincs, a páciensek ellátása érkezési sorrendben történik.
Elérhetőség
Orvos válaszol
Orvosi diagnózis és tanácsadás
A laborvizsgálat eredményét szakképzett, tapasztalt orvosok elemzik ki és ezt követően orvosi tanácsadás keretében javasolnak további lépéseket.