COVID-19 vakcináció

COVID-19 vakcináció

A SARS-2 vagy COVID-19 vírus felépítése, és sejtekbe való bejutása hasonló a HIV vírussal történő fertőződésre.  A vírus  RNS a vírus közepén helyezkedik el, ezt veszi körbe a Nucleocapsid fehérje. A vírus külső burkát képező lipid menránba további 3 fehérje ágyazódik be. Ezek az Envelope fehérje, a Membrán fehérje, és a Spike fehérje.  A fertőződés szempontjából a Spike fehérjének van szerepe, ugyanis ez a fehérje kötődik a  megfertőzendő sejt  ACE2 (angiotensin-converting enzyme 2 ) receptorához. Azonban ahhoz, hogy a vírus be tudjon jutni az ACE2 receptorral rendelkező sejtbe szükség van egy u.n  TMPRSS (transmembrane protease serine 2) coreceptorra is.  Csak az a sejt tud megfertőzödni, amelyik felszínen mindkét receptor megtalálható.

A COVID fertőzés után meghatározott sorrendben jelennek meg a diagnosztika számára mérhető vírus partikulumok, ( RNS, illetve antigén) illetve ellenanyagok.

A vírus RNS a fertőződés után 4-5 nappal már PCR technikával mérhető, és egyedi eltéréstől függően 10-12 napig pozitív marad. A gyorstesztekkel kimutatható  antigén szinte egyszerre mutatható ki a vírus RNS-sel, de csak 4-5 napig marad pozitív. Irodalmi adatok szerint ha már vírus antigén nem mutatható ki, akkor a vizsgált személy nem fertőz.  Ezért fogadják el sok helyen a PCR vizsgálatok helyett a gyorsteszttel végzett antigén vizsgálatokat. A vírus ellen termelődött ellenanyagok a fertőzés után meghatározott sorrendben jelennek meg. A járvány elején  a COVID-19 IgA és IgM

ellenanyagok egyértelműen korai fertőzésre utaltak, ilyen esetben javasolt, indokolt volt a PCR vizsgálat elvégzése.

A járvány szempontjából fontos volt a szennyvíz COVID-19 RNS vizsgálata, hiszen a vírus ürítés a széklettel hamarabb történik, mint ahogyan ezt az orr illetve garat mintákból ki lehet mutatni. Ezzel előre lehetett jelezni, hol várhatóak nagy számban az újabb fertőzések.

Miért volt fontos a járvány kezdeti szakaszában a COVID 19  IgA, illetve az IgM kimutatása?

Eddigi ismereteink szerint az N-IgM jelenik meg leghamarabb, a tünetek megjelenése után 2-3 nappal. Az S-IgM ezt követően, kb az 5. nap körül jelenik meg, párhuzamosan az IgA ellenanyaggal. Ebben a periódusban már mérni lehet a totál IgM-t és IgG-t is.

Az N-IgM és N-IgA megjelenésekor aktív a vírusszaporodás, azaz PCR pozitivitás van. Tehát olyan teszttel végzett IgM és IgA pozitivitás, mely az N-ellenanyagokat ki tudja mutatni, jelezheti a korai fertőzést, ebben az esetben javasolt a PCR vizsgálat. PCR pozitivitás esetén pedig el kezdeni a kontaktuskutatást. Az N-IgM a fertőzés után kb. 3 hónappal éltűnk.

Megfelelő teszttel végzett szerológiai  szűrővizsgálatok alkalmasak lehetnek a korai fertőzések kimutatására.

Azok a tesztek, melyek csak IgG-t tudnak kimutatni, a korai fertőzést nem jelzik, csak a korábban lezajlott, már PCR negatív  fertőzést tudják azonosítani.

A vakcinák megjelenése után egyre fontosabbá vált, hogy meg lehessen különböztetni azokat az ellenanyagokat, melyek a vakcina eredményességét, illetve azokat az ellenanyagokat, melyek a lezajlott COVID fertőzést igazolják.

Sokszor felmerül a kérdés, hogy az első vakcina beadása után hány emlékeztető oltásra van szükség,  hogyan mérhető a  vakcina eredményessége, mennyire tartós a vakcina következtében kialakult ellenanyag szint,  van-e valamilyen káros következménye a többször ismételt vakcinációnak.

Egyre több cikk foglalkozik azzal, hogy nem elegendő a humorális immunválaszt nézni, hanem a celluláris immunválasznak, elsősorban a memória T sejteknek fontos serepe van a fertőzés elleni védekezésben.  Sok személy  még 3 eredményes vakcináció után sem kerülte el a fertőzést, annak ellenére, hogy magas Spike IgG ellenanyag títerrel rendelkezett.  Az újabb COVID fertőzés a már korábban lezajlott fertőzés sem tudja kivédeni,  sokan estek át második, esetleg harmadik fertőzésen.  A vakcináció mai tudásunk szerint ugyan nem akadályozza meg a fertőzést, de mindenképpen szerepet játszik a betegség enyhébb lefolyásában.

A celluláris immunitás (memoria T sejtek) mérésére ma már vannak elérhető laboratóriumi módszerek.

A Magyarországon használt vakcinák

1. m-RNS vakcina (Pfizer, Moderna)

A vakcináció során m-RNS-t juttatnak a szervezetbe. Az mRNS a COVID Spike fehérjék sejtfelszinen történő megjelenését indítja be, ami ellen megindul a specifikus IgG ellenanyag termelés.

Az m-RNS vakcinák után a Spike (RBD azaz Receptor Bound Doman) IgG fehérje 2 héttel már mérhető.

2. Vektor alapú vakcinák (Astra Zeneca, Sputnik-V)

Elölt adenovírusba csomagolt Spike fehérjét kódoló gént tartalmaz. Az Astra Zeneca esetében min a két oltásnál azonos adenovírust, míg a Sputik-V esetében eltérő adenovírus használnak.

3. Elölt teljes vírus használó vakcina (Sinopharm)

Teljes, elölt, inaktivált vírus, nem fertőzőképes.

Gyártás során fel kell szaporítani a vírust, majd kémiai módszerrel inaktiválni.

A vírus hatékonyságát növeli  az adjuváns, azaz vivőanyag

( Ilyen technológiával készül a influenza vírus elleni, illetve a gyermekbénulás elleni oltóanyag)

Kérdés, hogy az oltás hatására a Spike ellenanyagon kívül még milyen ellenanyag termelődik.

Mérhető ellenanyag a 2. oltás után jelentkezik.

Annak érdekében, hogy a Pfizer vakcináció után hogyan indul be a Spike ellenanyag képzés, saját  korábban fertőzésen át nem esett dolgozóinknál Spike ellenanyag vizsgálatát végeztük el. (Elecsys 411)  az eredményt U/ml-ben kaptuk.

100%-nak tekintettük a títert 10 nappal a másik oltás után. Az egyedi eltérés igen magas volt.

Ellenanyag szint mérése

A vakcináció bevezetése után rendkívül fontossá vált, hogy lehessen mérni az oltás hatására kialakult ellenanyag szintet. Sokan a kapott eredmények alapján döntöttek az újabb oltások felvételéről.

A laboratóriumok nagyon hamar ráálltak a nagy vizsgálati számra alkalmas automaták beszerzésére, illetve a COVID ellenanyag vizsgálatára, akár hagyományos ELISA módszerrel, akár kémiai automatával vágezve.

E miatt vált egyre fontosabbá, hogy a QualiCont bevezesse a körvizsgálatokat a PCR vizsgálatokra, a szerológiai vizsgálatokra, és a POCT vizsgálatokra is.

A szerológia vizsgálatoknál a leggyakrabban használt készülékek  Roche Elecsys, Siemens, Beckmann, Abbott, DiaSorin.

A készülékek egy része egybe méri a Nucleocapsid és Spike ellenanyagokat, így nem tud különbséget tenni a lezajlott, illetve a vakcináció hatására kialakult ellenanyagok között. Van olyan készülék, amely egymástól függetlenül, kétféle teszttel nézi a Nucleocapsid, illetve Spike IgG ellenanyagokat, így el tudja különíteni, hogy az illető korábban átesett-e  a COVID fertőzésen.

A különböző automatáknak eltérő cut off számítása, van ahol az eredmény már 1 U/ml vagy AU/mlben pozitív, van olyan készülék, ahol ez a határérték 10, van ahol 30. E miatt az alacsony títerű mintákat egyes laborok pozitívnak, mások negatívnak értékeltek.

Ez elsősorba a Sinopharm vakcinák esetében okozott problémát, (a Sinopharm vakcinák esetébensokkal alacsonyabb az ellenanyag títer mint a többi vakcinánál) mert sok esetben negatív eredményt adtak ki, annak ellenére hogy valamilyen szintű ellenanyag  termelés megtörtént.

A QualiContnak igen fontos a szerepe,

 1./ A védettségi igazolvány kiállításához igazolni kellett a korábban lezajlott fertőzést

 2./ A vakcináció eredményességét jelenleg csak a Spike-IgG quantitatív mérésével lehet ellenőrizni

 3./ A vizsgálatok száma rohamosan emelkedett, ezért egységes szempontok szerint kell a vizsgálatokat végezni és az eredményeket   interpretálni.

Fontos, hogy a laboratóriumok olyan rendszereket használjanak,  melyek képesek a lezajlott fertőzést az eredményes vakcinációtól   elkülöníteni.

A vakcináció eredményes bizonyításához be kell tartani a „ türelmi időt”    azaz meg kell várni, hogy az immunrendszer ellenanyagot tud termelni.

A különböző vakcinák hatására igen eltérő ellenanyag válaszokat kaptunk, több mint 2.000 vizsgálat alapján, 6 hónappal a második vakcináció után. A Spike ellenanyag títer U/ml egységben van megadva.

Az 5 féle vakcina eredményasségét az alábbi ábrák mutatják, életkor függvényében, az eredmények a Spike IgG U/ml -ben vannak megadva.

Annak nyomon követesé, hogy a korábban fertőzésen át nem esett fiatal felnőttekben a vakcináció után hogyan emelkedik, illetve csökken a Spike ellenanyag szint, egy 41 éves nő, illetve egy 43 áves  férfi eredményeit mutatjuk.

Irodalom

COVID-19: angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expression and tissue susceptibility to SARS-CoV-2 infection Stephany Beyerstedt  ¹ , Expedito Barbosa Casaro  ¹ , Érika Bevilaqua Rangel  ^{2   3} Eur J Clin Microbiol Infect Dis . 2021 May;40(5):905-919.

Elecsys^® Anti-SARS-CoV-2 S Immunoassay for the quantitative determination of antibodies to the SARS-CoV-2 spike protein  (Roche)

Covid-19 antibody testing: what you need to know 5 March 2021info@harrowhealthcare.co.uk

The WHO International Standard for COVID-19 serological tests: towards harmonization of anti-spike assays Maria Infantino,^a,⁎ Massimo Pieri,^b,c,d Marzia Nuccetelli,^c Valentina Grossi,^a Barbara Lari,^a Flaminia Tomassetti,^d Graziella Calugi,^d Silvia Pancani,^a Maurizio Benucci,^e Patrizia Casprini,^f Mariangela Manfredi,^a and Sergio Bernardini^b,c,g Int Immunopharmacol. 2021 Nov; 100: 108095.

A comparison of SARS-CoV-2 nucleocapsid and spike antibody detection using three commercially available automated immunoassays Brad Poore,^a,b,⁎ Robert D. Nerenz,^a,b Dina Brodis,^c Charles I. Brown,^a,b,c Mark A. Cervinski,^a,b and Jacqueline A. Hubbard^a,b Clin Biochem. 2021 Sep; 95: 77–80.

SARS-CoV-2 elleni védőoltások eredményességének összehasonlító elemzése. ELTE-BTDK 2021 Máté Richard

A minőségellenőrzés szerepe a megfelelő ellenanyag kimutatására alkalmas teszt kiválasztásában az akut, valamint a lezajlott COVID fertőzés esetén és az eredményes vakcináció kimutatásábanDr Ujhelyi Eszter MikroMikoMed kft XI.Országos Infekciókontroll és Betegbiztonság Konferencia Budapest 2022 október 26-27

Az első magyar SARS-CoV-2 körvizsgálatokkal szerzett tapasztalatok Ujhelyi Eszter, Sárkány Erika, Danszky Dániel, QualiCont Kft Szeged. A SARS-CoV-2 vírusfertőzés laboratóriumi vizsgálata MLDT online szakmai rendezvény. 2020. október 15.

Nézzék meg a leggyakrabban végzett laborvizsgálat területeink bemutatását:

• Allergia, ételallergia vizsgálat
• STD szűrés
• Pajzsmirigy labor
• Tumormarker vizsgálat
• Hormonvizsgálat
• COVID szűrés

Vissza a GM Labor COVID-19 vakcináció blog oldalról a GM Labor főoldalra >